發(fā)布日期:2022-05-30 點擊率:54
毛細管電泳儀(CE)是以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力;
利用荷電粒子之間的淌度差異和分配系數差異進行分離,是分析科學繼液相色譜儀之后的又一重大進展;
使分析科學從微升級進入到了納升級水平,不僅使單細胞乃至單分子分析成為可能,也使蛋白質和核酸等生物大分子分析有了新的轉機。
由于CE溶質區(qū)帶的超小體積的特性導致光程太短,而且圓柱形毛細管作為光學表面不夠理想,對檢測器靈敏度要求相當高,檢測是CE分析的關鍵。
小分子檢測:
1、有紫外吸收:
首先選擇二極管陣列檢測器或UVD。
2、無紫外吸收:
(1)可衍生化:可先采用衍生的方法,再用UVD檢測,如氨基酸和還原性糖等。
(2)不可衍生化:可采用間接紫外法用UVD檢測,也可用電化學檢測器檢測。
3、有熒光或需要高靈敏度檢測:可用LIFD檢測。
4、需要測定結構或難以用光學檢測器檢測:可用MS檢測。
大分子檢測:
1、蛋白質和核酸:
(1)首先選擇UVD。
(2)需要高靈敏度檢測:可采用柱前或柱上衍生的方法標記熒光,再用LIFD檢測。
(3)需要特異性檢測:可使用特異性熒光探針標記后,再用LIFD檢測。
(4)需要測定分子量或氨基酸序列:可用MS檢測。
2、多糖:
(1)含量較高的多糖:可采用末端吸收法用UVD檢測。
(2)含量較低的還原性多糖:可采用衍生試劑標記后,再用LIFD和UVD檢測。
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